剛接觸Lateral flow產品的時候,要么是膠體金,要么是紅乳膠。也沒有想過還有更多變化。直到看到梅里埃之前的VIKIA系列的快診產品,才意識到彩色乳膠,可紅,可藍,可黃,可綠,可彩虹。有些產品就采用了多色顆粒在一個產品上。接觸過一個流感的產品,C線綠色,甲流藍色,乙流紅色。還有一種就是C線變色的設計,如BinaxNow的xinguan抗原試劑。
在使用之前,就有一條藍色C線。在完成測試之后,C線從藍色變成紅色。
今天介紹一款核酸試紙,來自南京沃博生物的Red-Blue雙色核酸試紙。它采用雙色系統(tǒng)不僅僅是為了好看,還有一番別出心裁。
沃博生物的核酸試紙的原理和其也是非常類似的,但是親和素用來偶聯(lián)了金顆粒,抗FITC抗體用來包被了T線。同時采用紅色膠體金顆粒對應T線和藍色乳膠顆粒對應C線。
試紙完成測試后,從左往右分別展示的是,陰性,陽性,無效,和假陽結果
當使用快速等溫擴增核酸,特別是RPA系統(tǒng)時,很容易出現(xiàn)假陽性結果。
通過使用Red-Blue雙色系統(tǒng),當出現(xiàn)假陽性結果時,就可以進行快速的假陽性分析。
假陽1,如果T線紅色比較強,可能核酸擴增出假陽
假陽1,如果T線紅色比較弱,可能引物形成二聚體
假陽2,如果T線藍色假陽,修飾了FITC的這段引物具備了捕獲Mouse IgG的特性,成了一個Aptamer。
這樣可以幫助科研人員快速的進行Trouble shooting, 也是多色系統(tǒng)一種創(chuàng)新的應用。
還把單T線升級到了雙T線,實現(xiàn)雙靶標雙系統(tǒng)檢測。
并且雙系統(tǒng)T線采用獨立的系統(tǒng),相互不會干擾和競爭。
單T線,
biotin-DNA-FITC
雙T線,
biotin-DNA-FITC
Digoxin-DNA-TAMRA
除了上述的彩虹核酸試紙,也有用于CRISPR的Cas12/13專用檢測試紙條。并且好調試好了檢測濃度。
檢測探針質量
在陰性對照中,稀釋探針的濃度至200 nM,進行切割反應。當試紙條結合墊端浸入Cas12/Cas13切割產物后的5~7 min內,試紙條T線顯色,即說明探針含游離的Biotin或者游離的FITC,探針純度不足導致假陽性結果。建議更換探針合成供應商,重新合成探針。
探針載量接受范圍
探針使用濃度為20~50nM的情況下,試紙條結合墊端浸入Cas12/Cas13切割產物后的30 min內,T線均不會顯色。
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