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Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針
| 貨號(hào) | T0403 | 售價(jià)（元） | 1805 |
| 規(guī)格 | 5×50μg | CAS號(hào) | 129787-64-0 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
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T0402 |
Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
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T0403 |
Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
產(chǎn)品介紹
Rhod-2是一種可見光激發(fā)的高親和力Ca2+指示劑，與其他可見光激發(fā)熒光探針如Fluo-3/4相比，Rhod-2具有長波長，更適用于檢測(cè)具有較高自熒光現(xiàn)象的細(xì)胞和組織內(nèi)鈣離子水平以及檢測(cè)由光感受器和籠鎖鈣離子螯合劑光激活導(dǎo)致的鈣離子釋放。
與紫外光激發(fā)的熒光探針相比，如Fura-2和Indo-1，可見光激發(fā)Ca2+探針具有以下特點(diǎn)：1）可被大多數(shù)設(shè)備的激發(fā)器有效激發(fā)，包括共聚焦激發(fā)掃描顯微鏡以及流式細(xì)胞儀等。2）具有更強(qiáng)的染料吸收性能，使得更低濃度的探針即可成功檢測(cè)Ca2+變化，從而降低了對(duì)活細(xì)胞的光毒性。3）Ca2+依賴性熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，對(duì)Ca2+變化水平檢測(cè)敏感度更高。4）降低樣品自熒光以及光散射的干擾。5）兼容光激活探針以及UV-激發(fā)試劑，因此更方便于多參數(shù)檢測(cè)。5）無光譜偏移。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(hào)（CAS NO.）：129787-64-0
分子式（Formula）：C52H59N4O19Br
分子量（Molecular Weight）：1123.9575
Ex/Em：549/ 578nm
溶解性（Solubility）：溶于DMSO
存儲(chǔ)條件：-20 ℃避光保存。
使用說明：
1） （可選）配制Pluronic F-127母液：100mg Pluronic F-127粉末中加入0.5ml DMSO，配制成20%(w/v)的DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存，不要冷藏。如果有結(jié)晶析出，可以重新加熱后溶解，不影響使用。
2）Hanks?balanced salt solution（HBSS,不含Ca2+, Mg2+）。
使用方法（本實(shí)驗(yàn)方案僅供參考，為得到最理想實(shí)驗(yàn)結(jié)果，需根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)情況優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。）
1）Rhod-2/AM儲(chǔ)存液的配制
利用高質(zhì)量無水DMSO溶解Rhod-2/AM配制成2-5mM的儲(chǔ)存液，該儲(chǔ)存液可分裝于-20℃避光干燥密封保存。每次使用前需回溫至室溫。
【注】：① 因?yàn)镽hod-2/AM在水中的溶解性和穩(wěn)定性較差，不可用水溶性緩沖液配制Rhod-2/AM儲(chǔ)存液。
② 溶解用的DMSO需要保證新鮮無水，否則將會(huì)導(dǎo)致AM 體水解，使熒光染料無法進(jìn)入細(xì)胞，影響實(shí)驗(yàn)效果。
2）Rhod-2/AM工作液的配制
利用合適緩沖液(如Hanks & Hepes )將Rhod-2/AM稀釋成1-10μM的工作液，具體稀釋方法如1 mM母液配制1 ml濃度為4 μM工作液，用1 ml 緩沖液稀釋4 μl 1mM母液即可，混勻。
【注】：① 典型工作液濃度為0.1-5μM，對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，我們推薦加載濃度4-5μM，具體的使用濃度需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。為了避免過度加載造成細(xì)胞毒性，建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用最低探針濃度。
② Rhod-2/AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍存。
3）（可選）如果Rhod-2/AM進(jìn)入細(xì)胞的效果不好，可向 Rhod-2/AM/DMSO 儲(chǔ)存液中加入適量20% Pluronic F127溶液，最終稀釋至其終濃度為0.02-0.05%，Pluronic F127 可以防止 Rhod-2/AM在緩沖液中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。
【注】：Pluronic F127可降低Rhod-2/AM的穩(wěn)定性，因此只建議在配制工作液時(shí)加入，不建議將其加入儲(chǔ)存液長期保存。
4）取出預(yù)培養(yǎng)的細(xì)胞，除去培養(yǎng)基，使用緩沖液洗滌細(xì)胞3次。
【注】：如果使用含血清的培養(yǎng)基，血清中的酯酶會(huì)分解 AM 體，從而降低Rhod-2/AM進(jìn)入細(xì)胞的效果。另外含有酚紅的培養(yǎng)基會(huì)使本底值略微偏高，所以加工作液之前需盡量去除培養(yǎng)基殘留。
5）將 Rhod-2/AM工作液加入細(xì)胞，加入量以覆蓋細(xì)胞為準(zhǔn)。在37℃培養(yǎng)15-60min，然后除去Rhod-2/AM工作液。
【注】：關(guān)于孵育的時(shí)間，如果首次做實(shí)驗(yàn)不能確定，建議先孵育30min，看熒光效果：如果細(xì)胞死亡較多，適當(dāng)縮短時(shí)間；如果熒光強(qiáng)度太弱，適當(dāng)延長時(shí)間。
6）用不含探針緩沖液洗滌細(xì)胞 3 次，以充分去除殘留的Rhod-2/AM工作液。然后加入緩沖液覆蓋細(xì)胞。
7）37℃培養(yǎng)箱孵育約 20-30min，以確保 AM 體在細(xì)胞內(nèi)的完全去酯化作用。
8）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品相關(guān)：
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貨號(hào) |
產(chǎn)品 |
規(guī)格 |
單價(jià)/元 |
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T5022 |
Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
361 |
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T5042 |
Fura-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1368 |
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T5062 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
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T5082 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
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T5040 |
Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
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T5060 |
Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
|
T5080 |
Fluo-8 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
427.5 |
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T5060 |
Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1805 |
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TG201 |
Indo-1, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
399 |
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TG221 |
Indo-1, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
1591.25 |
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T0404 |
Rhod-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
50μg |
845.5 |
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T0405 |
Rhod-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針 |
5×50μg |
2973.5 |
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S8223 |
Acridine Orange 吖啶橙熒光素 |
1g |
154 |
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S8224 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
1mg |
880 |
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S8225 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
5mg |
3080 |
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T601 |
BCECF, AM pH熒光探針 |
1mg |
1650 |
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WU057 |
Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液（1,000×） |
1ml |
320 |
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WU077 |
Monensin, Sodium Salt 莫能霉素（鈉鹽） |
100mg |
460 |
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WU045 |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A（5mg/ml） |
200μl |
410 |
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WU065 |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A（5mg/ml） |
1ml |
1500 |
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WU085 |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A（粉末） |
5mg |
1200 |
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WU050 |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A（粉末） |
25mg |
3500 |
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WU060 |
Ionomycin, Free Base 離子霉素（游離酸） |
1mg |
535 |
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WU070 |
Ionomycin, Free Base 離子霉素（游離酸） |
5mg |
1720 |
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WU072 |
Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素（鈣鹽） |
1mg |
535 |
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WU074 |
Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素（鈣鹽） |
5mg |
1720 |
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WU055 |
Calcium Ionophore A23187鈣離子載體 |
1mg |
320 |
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WU056 |
Calcium Ionophore A23187鈣離子載體 |
5mg |
1100 |
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WU057 |
Calcium Ionophore 4-bromo-A23187 鈣離子載體 |
1mg |
1200 |