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Human DiI-Low Density Lipoprotein （Human DiI-LDL） 紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白
| 貨號(hào) | H8696 | 售價(jià)（元） | 2728 |
| 規(guī)格 | 500μg | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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產(chǎn)品信息：
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貨號(hào) |
名稱 |
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價(jià)格 |
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H8696 |
Human DiI-Low Density Lipoprotein （Human DiI-LDL） 紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白 |
500μg |
2728元 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡(jiǎn)稱為LDL）是通過(guò)脂蛋白酯酶的水解作用，脫去極低密度脂蛋白（VLDL）中的甘油三脂，釋放游離脂肪酸轉(zhuǎn)化而來(lái)的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高，增加顆粒本身密度，從而得到LDL。LDL與脊椎細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合，然后通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將膽固醇運(yùn)輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞。因此，LDL可以用來(lái)研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過(guò)程，尤其是在動(dòng)脈粥樣硬化等疾病中，血漿來(lái)源的LDL還可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白（Human DiI-LDL）是標(biāo)記熒光探針Dil（1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）的LDL，可以用來(lái)觀察培養(yǎng)細(xì)胞的LDL結(jié)合位點(diǎn)，或篩選LDL受體表達(dá)缺陷型細(xì)胞突變株。也可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估細(xì)胞受體水平，或檢測(cè)組織內(nèi)的受體水平。 DiI-LDL是研究細(xì)胞內(nèi)吞作用非常好的標(biāo)記物。
warbio提供的Human DiI-LDL為無(wú)菌包裝，可以直接稀釋使用。除提供DiI-LDL，我們還提供不帶標(biāo)記的LDL，以及修飾化的LDL如乙?；?span>LDL（Ac-LDL），以及氧化修飾的LDL（Ox-LDL）。
產(chǎn)品屬性
濃度：0.8-3.0 mg/ml
外觀：乳狀液體
吸光度比例：Dil/Protein=555nm/275nm=1.30
緩沖液組分：0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
運(yùn)輸與保存方法：冰袋運(yùn)輸；4℃無(wú)菌，建議避光，收到貨后穩(wěn)定保存6周。切忌凍存！
制備與操作方法
純化的人健康血漿來(lái)源的LDL直接標(biāo)記上DiI熒光探針，然后通過(guò)超速離心以及透析的方法純化回收標(biāo)記產(chǎn)物，并濾膜過(guò)濾除菌。純化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS，pH 7.4中。
操作步驟
a) 無(wú)菌條件下，將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50 μg/ml。
b) 加入活細(xì)胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。
c) 孵育結(jié)束，吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養(yǎng)基，并用無(wú)探針的培養(yǎng)基洗幾次。
d) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
1) 熒光顯微鏡觀察
采用標(biāo)準(zhǔn)的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(zhǎng)為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請(qǐng)使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機(jī)溶劑。注：需設(shè)陽(yáng)性細(xì)胞以做對(duì)照。
2）細(xì)胞分選（流式細(xì)胞術(shù)）
胰蛋白酶處理細(xì)胞或者加入EDTA制成單細(xì)胞懸液，選用合適的已標(biāo)記純化細(xì)胞用作陰性和陽(yáng)性對(duì)照，從而進(jìn)行流式分選設(shè)門（gate）。（建議使用波長(zhǎng)為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm）。
注意事項(xiàng)
本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定，建議即配即用；
長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出，屬于正?，F(xiàn)象，低速離心2 min去除沉淀即可使用；
LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca2+和Mn2+的參與，過(guò)量EDTA的存在會(huì)抑制其結(jié)合；
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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